Realizamos tres pruebas. Una para la observación del principio de cromatografía y otras dos para la extracción de pigmentos fotosintéticos.
Objetivo:
Observación de los pigmentos fotosintéticos al reaccionar con alcohol y acetona.
Observación de los pigmentos fotosintéticos al reaccionar con alcohol y acetona.
Materiales:
Materiales de laboratorio
- Papel secante
- Gradillas
- Tubos de ensayo
- Tijeras
- Mortero
- Pipetas
- Basos de precipitado
- Pinzas
- Placas de petri
- Folios
- Tiza
Reactivos
- Alcohol
- Acetona
Materiales biológicos
- Lechuga
- Granos de tierra
Metodología:
Prueba para demostrar el principio de cromatografía:
- Recortamos una tira de papel secante que quepa en ancho en un vaso de precipitados.
- Dibujamos cuatro puntos con los rotuladores permanentes.
- Depositamos en un vaso con una pequeña cantidad de alcohol.
- Listo. Observamos.
Prueba de la extracción de pigmentos fotosintéticos:
- Cortamos en cuadraditos la lechuga y la depositamos en un mortero.
- Trituramos y removemos con un poco de alcohol hasta obtener una especie de caldo (nos ayudamos con granos de tierra para facilitar la rotura de las células).
- Finalmente retiramos con un colador los restos sólidos y vertemos el líquido en un vaso de precipitados.
- Vertemos aproximadamente la mitad de la mezcla obtenida en una placa de petri.
- Recortamos nuevamente una tira de papel secante esta vez para poder doblarla a la mitad y conseguimos su verticalidad al apoyarla en la placa de petri.
- Listo. Observamos.
Prueba (extra) de la extracción de pigmentos fotosintéticos con la mezcla restante:
- Dejamos escurrir por la pared del tubo de ensayo que contiene la mezcla sobrante acetona.
- Listo. Observamos.
Resultados:
Se puede observar a la perfección la extracción de pigmentos:
- En las primeras imágenes observamos la extracción de los pigmentos.
- En las imágenes intermedias se divide las sustancias en el siguiente orden de abajo a arriba: Clorofila B (verde clarito), Clorofila A (verde oscuro), Xantofila (amarillo) y Carotenos (color verde casi sin pigmentación)
- En la última imagen se confirma la extracción de los pigmentos con una coloración de un tono verdoso fuerte.
PRUEBA PRINCIPIO DE CROMATOGRAFÍA |
PRUEBA EXTRACCIÓN DE PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS |
PRUEBA EXTRA |
Conclusión:
Según los conocimientos previos a la práctica, esta se realizará en base al principio de cromatografía. El principio se basa en la separación de dos o más compuestos con propiedades físicas diferentes que les permiten repartirse en dos fases: una estacionaria y otra móvil. Esto se observa perfectamente en la prueba realizada en primer lugar.
Los pigmentos fotosintéticos están compuestos por unas sustancias (Xantofilas, Carotenos, Clorofila B y Clorofila A) que pueden ser separadas con la técnica citada anteriormente. En el campo de su utilización hacía la extracción de pigmentos fotosintéticos, el principio de cromatografía, se basa en el distinto grado de solubilidad de los distintos pigmentos en el alcohol cuando son absorbidos y distribuidos en un papel.
Por lo tanto, los resultados fueron los esperados y pudimos observar la extracción de los pigmentos fotosintéticos. Cabe recalcar que a mayores añadimos en el último momento una tiza a la placa de petri y pudimos observar también esta diferenciación.
Por último, en la prueba extra pudimos observar que gracias a la Acetona, disolvente orgánico que además de disolver los pigmentos es soluble en agua, se extrajeron con éxito.
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